IV Jornadas Latinoamericanas de Bacteriófagos

Resumen

Los bacteriófagos de la clase Caudoviricetes desempeñan un papel clave en la dinámica microbiana y poseen un gran potencial biotecnológico, especialmente en el contexto de la fagoterapia. Un paso crítico en el ciclo lítico de estos virus es el empaquetamiento del ADN viral en la cápside, un proceso mediado por el complejo de terminasas. Este proyecto tiene como objetivo caracterizar estructural y funcionalmente las terminasas de fagos representativos de las familias Podoviridae (ZC03 y ΦXacm4-11), Siphoviridae (ZC01) y Myoviridae (LafX), aislados en el laboratorio del promotor. El enfoque experimental incluye la clonación heteróloga y la expresión de genes codificantes de terminasas, la purificación de las subunidades y el análisis de las interacciones del ADN mediante técnicas bioquímicas y biofísicas (como EMSA, ITC y DSF), así como ensayos de actividad de ATPasa y endonucleasa. El análisis estructural se realizará mediante microscopía electrónica de transmisión con tinción negativa y crio-microscopía electrónica (crio-EM). Hasta el momento, se ha logrado la construcción y expresión de dos vectores, cada uno portador de una proteína del complejo de terminasas del fago ZC01, además de obtener las primeras imágenes mediante microscopía electrónica. Actualmente se continúa con las metodologías necesarias para la obtención de los vectores correspondientes a cada fago. Se espera que este proyecto genere datos estructurales y funcionales que permitan comparar los mecanismos moleculares empleados por las terminasas de diferentes familias virales, contribuyendo así a la comprensión de las estrategias de empaquetamiento del ADN en fagos y abriendo nuevas vías para la aplicación de estas proteínas en biotecnología y terapias basadas en virus.