Congreso Uruguayo en Una Salud - I Jornada Académica del Instituto de Investigación Una Salud

Problema: Los flavivirus, como dengue (DENV), Zika (ZIKV), fiebre amarilla (YFV) y virus del Nilo Occidental (WNV) entre otros, representan una amenaza constante para la salud pública global, con un alto potencial epidémico y sin terapias antivirales aprobadas actualmente. Dada la urgencia de desarrollar tratamientos efectivos, se exploró la proteína de la cápside (CP) como un nuevo blanco terapéutico. A través de un “screening” de compuestos se identificó C10, una pequeña molécula con amplia actividad antiviral frente a miembros de la familia Flaviviridae.
Metodología: Se emplearon ensayos de infección celular para evaluar la actividad antiviral de C10 frente a múltiples flavivirus (DENV1-4, ZIKV, YFV, TBEV, WNV, JEV y HCV). La cuantificación se realizó mediante Western Blot, qPCR y/o microscopía. Para caracterizar la interacción de C10 con CP, se expresaron y purificaron proteínas de cápside de DENV y HCV en E. coli, analizándose por ensayos de entrecruzamiento. La toxicidad se evaluó en líneas celulares, peces cebra y modelos murinos. Además, se llevaron a cabo estudios de relación estructura-actividad (SAR) para la identificación de derivados mejorados.
Resultados: C10 mostró actividad antiviral notable frente a todos los flavivirus evaluados, con valores de IC₅₀ en el rango de 10–200 nM y CC₅₀ > 50 µM, alcanzando un índice terapéutico elevado. No presentó actividad significativa frente a virus no relacionados, como influenza A o VIH. En ensayos in vitro, C10 indujo la formación de dímeros, trímeros y oligómeros de CP, actuando como un entrecruzador específico. C10 puede penetrar partículas virales previamente ensambladas y reducir su infectividad sin afectar la liberación ni el empaquetamiento del genoma, interfiriendo principalmente en la etapa de desencapsidación. Por otro lado, estudios de relación estructura-actividad (SAR), llevaron a la identificación de un derivado mejorado, C45, el cual demostró ser tres veces más potente que C10, manteniendo un perfil de toxicidad similar. En peces cebra infectados con ZIKV, el tratamiento con C45 redujo las copias virales por debajo de los niveles control a los tres días post-fertilización, y C10 redujo efectos morfológicos severos generados por la infección.
Discusión: La capacidad de C10 para entrecruzar la CP interfiere con la formación y desencapsidación del virus, bloqueando pasos críticos del ciclo replicativo. La correlación entre la actividad antiviral y la capacidad de entrecruzamiento refuerza este mecanismo. Estos resultados confirman que la CP es un blanco farmacológico válido para antivirales de amplio espectro contra flavivirus.
Conclusiones: C10 y C45 son compuestos prometedores con actividad pan-antiflaviviral, buen perfil de seguridad y un mecanismo innovador basado en la alteración de la cápside viral. Su eficacia in vitro e in vivo, junto con su amplio espectro y ventana terapéutica favorable, los posicionan como candidatos sólidos para el desarrollo de antivirales frente a flavivirus.