Congreso Uruguayo en Una Salud - I Jornada Académica del Instituto de Investigación Una Salud

Las Enfermedades Tropicales Desatendidas son infecciones que afectan principalmente a poblaciones en situación de pobreza, con condiciones de higiene y saneamiento deficientes. Entre los agentes causales de las enfermedades se encuentran los protozoos parásitos Trypanosoma cruzi y Leishmania spp., causantes de la enfermedad de Chagas y la leishmaniasis, respectivamente, enfermedades prevalentes en Latinoamérica. Dado que el tratamiento farmacológico para las infecciones causadas por estos parásitos se ha desarrollado durante muchos años y presenta efectos secundarios y toxicidad, es importante continuar desarrollando nuevos fármacos para el tratamiento de estas enfermedades. En este sentido, el Laboratorio de I+D de Moléculas Bioactivas de CENUR LN ha sintetizado y evaluado diferentes compuestos con potente actividad contra Trypanosoma cruzi y Leishmania spp., capaces de eliminar los parásitos in vitro y reducir la carga parasitaria en modelos animales in vivo. De los compuestos diseñados, actualmente estamos trabajando con dos compuestos que resultaron exitosos tras la evaluación de actividad, selectividad, citotoxicidad y mutagenicidad. Dada la proximidad filogenética entre T. cruzi, Leishmania spp. y T. brucei, es posible que los compuestos tengan actividad antiparasitaria contra los tres cinetoplástidos.
Los compuestos evaluados han mostrado mayor actividad que Nfx, Bnz y miltefosina en T. cruzi y Leishmania, y también mostraron actividad en una cepa de L. infantum aislada en Uruguay. Sin embargo, dado que estos compuestos se han identificado mediante cribado fenotípico, es importante investigar las posibles vías implicadas en su mecanismo de acción para orientar la optimización de estas moléculas.
Datos previos permitieron la identificación de genes implicados en el mecanismo de acción de los compuestos. Para ello, se utilizaron bibliotecas de ARN de interferencia de T. brucei (RIT-seq) y bibliotecas de cósmidos que sobreexpresan el genoma de T. brucei, y se identificaron genes asociados con el mecanismo de acción de los compuestos. Para continuar determinando las posibles vías implicadas en el mecanismo de acción de los compuestos, seguiremos utilizando estas herramientas de silenciamiento y sobreexpresión genómica.
Planeamos continuar con la validación individual de estos genes previamente identificados y realizar estudios transcriptómicos en T. cruzi como otra herramienta para comprender el mecanismo por el cual estos compuestos provocan la muerte de los parásitos.
Nuestros resultados actuales incluyen el análisis del mecanismo de muerte activado en presencia de los compuestos mediante citometría de flujo. También identificamos genes activados en presencia de los compuestos y generamos líneas celulares transfectadas para analizar el efecto generado por el silenciamiento o la sobreexpresión de genes identificados como posibles dianas de los compuestos. En las próximas actividades se intentará proponer posibles hipótesis sobre la implicación de estos genes en el mecanismo de acción de los compuestos y posibles modificaciones para optimizar el compuesto y continuar su validación como posible antitripanosomátido.