Congreso Uruguayo en Una Salud - I Jornada Académica del Instituto de Investigación Una Salud

La detección de residuos de antibióticos en la cadena láctea es una actividad clave para proteger la salud de los consumidores. Se considera necesario contar con métodos de tamizaje rápidos que permitan optimizar los recursos en aquellas muestras que se consideren susceptibles a estar contaminadas. En esta línea, la espectroscopía en el infrarrojo cercano (NIR) se considera una técnica ideal ya que la misma es rápida y no destructiva. Se considera que el desarrollo de estos métodos, amigables con el ambiente, para el tamizaje de antibióticos en alimentos de origen animal destinados al consumo humano, constituye una línea de trabajo relevante en el marco de Una Salud.

Se propone como objetivo desarrollar un método de tamizaje rápido, no destructivo y sin generación de residuos, basado en espectroscopía NIR, para clasificar muestras de leche según presenten o no residuos de antibióticos.

Se decidió comenzar con amoxicilina y oxitetraciclina por su disponibilidad y considerarlos dos antibióticos representativos de los dos grupos más utilizados para los tratamientos de mastitis bovina, β-lactámicos y tetraciclinas. Se prepararon soluciones estándar en agua de cada antibiótico a una concentración 20.000 veces superior al límite máximo de residuo (MRL), a fin de fortificar soluciones de leche sin diluir la misma. Se fortificaron 3 lotes de una marca de leche ultrapasteurizada a concentraciones de 0,5, 1, 10, 50 y 100 veces el MRL.

Los espectros NIR se registraron en un analizador Thermo Scientific Antaris II DR mediante transflectancia, colocando las muestras en celdas de cuarzo de 0,1cm y cubriendo las mismas con papel aluminio como reflector. Se obtuvieron dos espectros para cada muestra fortificada y tres espectros de leche sin fortificar por lote.

Los datos se separaron en set de calibración y validación, en relación 7:3, mediante aleatorización estratificada por nivel y analito. Se procesaron los espectros en TQ Analyst 9.12 aplicando la corrección mediante variación normal estándar (SNV) y se construyó un modelo de análisis de componentes principales (PCA) para clasificar las muestras en dos grupos: negativas y positivas a residuos de antibióticos según la menor distancia de Mahalanobis a los centroides de clase.

El modelo empleó 50 estándares de calibración y 22 de validación, con ocho componentes principales. En los datos de validación se observaron 18 verdaderos positivos, 2 falsos positivos, 2 verdaderos negativos y 0 falsos negativos. Con esos resultados, la exactitud es 90,9 %, la sensibilidad 100 %, la especificidad 50 % y la precisión (valor predictivo positivo) 90 %.

El método desarrollado presentó buen desempeño para tamizaje rápido de residuos de antibióticos en leche, con determinaciones en tiempos menores a 1 minuto por muestra, sin destruir las mismas y sin generar residuos. Si bien estos resultados son prometedores, este trabajo debe entenderse como una prueba de concepto, debiendo ampliarse la diversidad de matrices y de antibióticos para verificar su desempeño. Este trabajo constituye un punto de partida hacia métodos sostenibles de control de antimicrobianos en la cadena láctea, con impacto positivo en la salud humana y en línea con Una Salud.